Dusík je plyn, ktorý sa vo výrobe často používa, spolu s tuctom ďalších inertných zlúčenín. Nie je vždy vhodné tento plyn prepravovať alebo skladovať v čistej forme a niekedy stačí zistiť jeho prítomnosť v látke. Na tento účel sa používa Kjeldahlova metóda. Kjeldahlova metóda spočíva v tom, že dusík, ktorý je obsiahnutý v bezproteínovej filtrovanej kvapaline, sa počas spaľovacej reakcie s kyselinou sírovou mení na amónny. Výsledný amoniak sa po alkalickej reakcii voľne uvoľňuje.
Inštrukcie
Krok 1
Na analýzu odoberte 4 ml krvi, plazmy alebo séra a zriedte ich 8 ml destilovanej vody. Do tej istej banky sa pridá 8 ml kyseliny trichlóroctovej. Roztok dobre premiešajte a prefiltrujte.
Krok 2
Do destilačnej banky nalejte 5 ml filtrovanej kvapaliny, ktorá štandardne obsahuje 1 ml analyzovanej krvi. Pridajte tam 1 ml činidla č. 2, zahrejte banku na miernom plameni, kým sa neobjaví biela para.
Krok 3
Banka sa umiestni tak, aby sa jej dno len mierne dotýkalo plameňov. Proces spaľovania sa považuje za ukončený, keď je kvapalina modrastá alebo bezfarebná.
Krok 4
Banku odstavte, aby vychladla. Dosť na to jeden a pol až dve minúty. V opačnom prípade sa vytvorí nerozpustná zrazenina.
Krok 5
Nalejte vodu dole po stene a opláchnite ňou lievik. Pretrepte do zamiešania a prípadne zahrejte banku.
Krok 6
Zostavte zariadenie, pripojte prijímač. Do prijímača dajte 10 ml 0,01 N. roztok kyseliny sírovej. Pridajte jednu alebo dve kvapky metylrotu. Po zmiešaní všetkých prísad pripevnite čerpadlo vodného lúča k prijímaču.
Krok 7
Začnite prechádzať vzduchom cez prípravok, nalejte 33% hydroxidu sodného do destilačnej časti, až kým tekutina nezmení farbu na bezfarebnú na tmavomodrú alebo tmavohnedú. To naznačuje alkalickú reakciu.
Krok 8
Po desiatich minútach destiláciu zastavte. Zatvorte kohútik vodného lúča, otvorte zástrčku prijímača a opláchnite kyselinu sírovú z konca chladiacej trubice. Nahraďte iným prijímačom s rovnakou hlasitosťou 0,01 N. roztoku kyseliny sírovej, urobte druhú destiláciu.
Krok 9
Do prvého prijímača pridávajte hydroxid sodný, kým sa nedosiahne stabilná žltá farba po dobu 30 sekúnd.
Krok 10
Záver: 1 ml 0,01 N. kyselina sírová alebo hydroxid sodný zodpovedá 0,14 mg dusíka.
Rozdiel medzi množstvom kyseliny sírovej vloženej do zbernej nádoby a množstvom hydroxidu sodného odobraným počas titrácie, vyrobeným pri 0,14 mg, sa rovná množstvu zvyškového dusíka v testovanom 1 ml krvi. Ak chcete zobraziť množstvo dusíka v miligramoch, musí sa výsledok vynásobiť 100.
